teknova培養(yǎng)基的安全使用秘籍
發(fā)布日期:2025-09-22 點(diǎn)擊:3
以下是關(guān)于teknova培養(yǎng)基的安全使用秘籍,涵蓋配制、滅菌、儲(chǔ)存、操作等關(guān)鍵環(huán)節(jié)的注意事項(xiàng)和規(guī)范流程:
1.精準(zhǔn)配制與溶解
嚴(yán)格按配方稱量:配料時(shí)需逐一加入藥品并充分?jǐn)嚢枞芙?,尤其注意淀粉類成分?yīng)先用少量冷水調(diào)成糊狀后再加熱溶解;含瓊脂的培養(yǎng)基必須煮沸以確保全融化,同時(shí)邊加熱邊攪拌防止燒焦。
pH值調(diào)節(jié):使用1N鹽酸或NaOH溶液調(diào)整至目標(biāo)范圍,這是微生物生長(zhǎng)的關(guān)鍵參數(shù),直接影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
過濾澄清(可選):通過濾紙或棉花去除雜質(zhì),提升培養(yǎng)基純凈度。
2.teknova培養(yǎng)基科學(xué)分裝與密封
容器選擇與容量控制:靜置培養(yǎng)時(shí),每250mL三角瓶不超過100mL培養(yǎng)基以避免滅菌時(shí)沸騰污染棉塞;搖瓶培養(yǎng)則建議15–20mL/瓶以保證通氣性。試管分裝時(shí),液體培養(yǎng)基占試管高度的1/4,固體斜面約為1/5。
包扎防護(hù):分裝后立即用棉塞封口,并以牛皮紙包裹防潮,確保滅菌過程中水分不滲入導(dǎo)致污染。
3.滅菌工藝優(yōu)化
高壓蒸汽滅菌參數(shù)管控:嚴(yán)格按照配方要求的溫度和壓力進(jìn)行滅菌,避免過高溫度破壞營(yíng)養(yǎng)成分(如糖分焦化、氨基酸變色)。滅菌后趁熱擺放試管斜面,使其凝固成合適角度供后續(xù)接種使用。
現(xiàn)配現(xiàn)滅原則:未滅菌的培養(yǎng)基不可長(zhǎng)時(shí)間放置,必須及時(shí)處理并盡快使用,防止微生物滋生。
4.規(guī)范化儲(chǔ)存管理
低溫避光保存:未開封的培養(yǎng)基于2–8℃冷藏,避免冷凍導(dǎo)致瓊脂破裂或成分沉淀;已開封的應(yīng)密封后盡快用完,減少反復(fù)溫變帶來(lái)的風(fēng)險(xiǎn)。光敏感型培養(yǎng)基需額外避光處理以防止有效成分降解。
有效期監(jiān)控:定期檢查保質(zhì)期及物理狀態(tài)(如顏色、透明度),過期或異常(如渾濁、干裂)的培養(yǎng)基嚴(yán)禁使用。
5.teknova培養(yǎng)基無(wú)菌操作與環(huán)境控制
生物安全柜內(nèi)作業(yè):實(shí)驗(yàn)前開啟紫外燈照射30分鐘消毒,隨后啟動(dòng)風(fēng)機(jī)和照明,用消毒劑擦拭臺(tái)面并等待5分鐘凈化空氣。操作時(shí)雙臂緩慢進(jìn)入柜內(nèi),保持離前窗10cm以上距離,廢棄物及時(shí)放入專用容器。
減少污染概率:集中完成樣品檢測(cè),避免頻繁開蓋;傾倒培養(yǎng)基時(shí)控制溫度在45℃左右,既防止高溫燙死目標(biāo)菌又避免低溫凝固影響鋪板效果。
6.使用前的驗(yàn)證與測(cè)試
空白對(duì)照實(shí)驗(yàn):每批新配培養(yǎng)基均需做空白試驗(yàn),確認(rèn)無(wú)雜菌生長(zhǎng)。對(duì)于關(guān)鍵類型(如血瓊脂),可通過接種標(biāo)準(zhǔn)菌株驗(yàn)證溶血性等功能特性;選擇性培養(yǎng)基則需測(cè)試目標(biāo)菌的顯色反應(yīng)是否符合預(yù)期。
外觀質(zhì)檢:使用前觀察平板是否光滑均勻、液體是否澄清無(wú)沉淀,異常情況(如變色、氣泡增多)可能提示污染或失效。
7.配套工具與樣本處理
器具滅菌標(biāo)準(zhǔn)化:玻璃器皿采用干熱滅菌法,金屬工具(如接種環(huán))通過灼燒冷卻后使用。取樣器具需預(yù)先用75%酒精消毒,避免接觸瓶口造成交叉污染。
樣品代表性采集:遵循隨機(jī)抽樣原則,準(zhǔn)確記錄稀釋倍數(shù)和計(jì)量體積,確保檢測(cè)結(jié)果能真實(shí)反映樣本狀況。
8.teknova培養(yǎng)基過程監(jiān)控與異常應(yīng)對(duì)
培養(yǎng)條件動(dòng)態(tài)跟蹤:在恒溫培養(yǎng)箱中實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)溫度波動(dòng),按《微生物檢驗(yàn)規(guī)范》定時(shí)觀察菌落形態(tài)及生長(zhǎng)速度,發(fā)現(xiàn)異常立即分析原因并反饋。
應(yīng)急措施準(zhǔn)備:若懷疑污染發(fā)生,可取少量培養(yǎng)液接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板進(jìn)行48小時(shí)驗(yàn)證,同時(shí)檢查高壓滅菌設(shè)備的有效性及過濾系統(tǒng)的完整性。
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